Hvordan isolerer forskere DNA for å studere det?

Hvordan isolerer forskere DNA for å studere det?
Anonim

Svar:

Det er et par skritt for å gjøre dette, vennligst ignorere min dårlige engelsk, jeg håper du fortsatt kan forstå prosessen.

Forklaring:

Dette er ikke så vanskelig som du kanskje tror.

La oss si at vi vil isolere DNA ut av en kalv thymus, du må følge disse instruksjonene (de er de samme for et eple så vidt jeg vet, men det er små variasjoner):

  1. Ta 3 stk. 3 gram og klipp det i små stykker, så lite som mulig.

  2. Sett det i en blender, med 75 ml salt-natriumsitrat (SSC) per stykke, og kontroller at blenderens blader er helt dekket i SSC, så legg til et stykke thymus hvis du trenger det.

    SSC sørger for at cellemembranene blir oppløst.

    Fortsett å blande til alt er glatt.

  3. Sett det i et rør for sentrifugen og tørk det med et annet rør, slik at sentrifugen ikke går i stykker

  4. Plasser røret i sentrifugen i 20 minutter ved 5000 rpm

  5. Når du får rørene ut av sentrifugen du bør se, holder du to komponenter. Bunnen har en fast substans, dette kalles pellet og dette holder cellekjernene med DNA. Du vil også se et flytende stoff, som kalles supernatanten, og dette består av SSC med de oppløste cellemembranene.

  6. Hell supernatanten i en væskebevegelse, dette kalles dekantering, og dette etterlater deg med pellet.

  7. Sett en liten mengde 2,2 M NaCl i røret med pellet, slik at pellet bare er dekket i NaCl. NaCl forårsaker proteiner som omgir DNA til å utfelle.

  8. Rør det med et tomt reagensrør eller omrøringsstang. Til slutt bør du få to komponenter. Proteinene på bunnen og en viskøs væske på toppen av det.

  9. Ta ut det viskøse væsken med en pipette og sørg for at du ikke tar noen proteiner med det viskøse væsken. (veldig små biter av protein er svært vanskelig å unngå, men prøv å unngå så mange proteiner som mulig)

  10. Sett det viskøse væsken som du pipetterte i et beger og tilsett 2 ganger så mye etanol til det. Men legg til etanol forsiktig fordi du ikke vil blande det med DNA. Ved grensesnittet mellom etanol og viskøs væske bør du se DNA-bobler som kommer opp.

  11. Rør forsiktig med en glassstang, DNAet er negativt ladet, slik at det skal holde fast i stangen.

  12. Sett det i et reagensrør og oppløs det med SSC.

En spesiell maskin kan da fortelle hvor mye DNA du har isolert og hvor rent det er.