Svar:
GAPDH brukes ofte som lastekontroll.
Forklaring:
I Western blotting bruker vi ofte GAPDH som lastekontroll. Hva dette betyr er at ved å undersøke GAPDH, kan vi kontrollere at vi har en lastet tilsvarende mengder proteiner på forskjellige baner i blottet.
Et eksempel på bruk - si at vi har en sykdom som vi tror fører til en forhøyning av et bestemt protein i cellen. Vi ville lage en prøve fra "sunne" celler og en annen prøve fra "syke" celler. Vi ville da laste ekvivalente protein mengder av begge prøver på en gel for Western blot.
Etter å ha undersøkt blottet for vårt protein av interesse, finner vi det i de syke cellene at proteinnivået faktisk er forhøyet (det er et mørkere bånd som produseres på blottet). For å bevise at denne økningen i protein skyldes en forandring av uttrykket i cellen, i stedet for en lastingsartefakt (det vil si, jo mer instansbåndet er forårsaket av en forandring i proteinuttrykk i cellene, og ikke av oss tilfeldigvis laster mer av "sykdomsprøven" enn "sunn"), ville vi også sonde blottet for GAPDH for å vise at de totale proteinnivåene er de samme i begge baner.
Ved å gjøre dette viser vi at ekvivalent protein har blitt lastet i de to banene, og at forandringen i båndintensitet vi observerer skyldes endringer i proteinuttrykk for proteinet av interesse.
Hvorfor brukes litotes? + Eksempel
Litotes bruker underdrivelse for å understreke en ide eller situasjon. Litografier, per definisjon, er talespråk som skaper en underdrivelse ved å bruke doble negativer. For eksempel: "Hun er ikke en veldig jordnær person." "The Sour Blasterz candy var ikke surt, for å være ærlig." "Å spille ute i tordenvær er ikke en god ide." Litotes forsøker bruk underdrivelse for å skape en ironisk effekt. De er også dobbelt negative uttalelser siden de bekrefter en ide ved å negere motsatt. Enda viktigere, det bringer oppmerksomheten til en
Hvorfor brukes formell kostnad? + Eksempel
Fordi det gir oss en ide om elektronisk struktur. Selvfølgelig er formell avgift en formalisme. Det er at det ikke har noen ekte eksistens, men konseptet kan være nyttig for å forstå struktur og binding. Vi presenteres veldig tidlig på ideen om at "kovalent binding" skyldes deling av elektroner og "ionisk binding" fra overføring av elektroner. Således har det nøytrale molekylet metan, CH_4, ingen ladningsavskillelse, og ion-arten NaCl kan representeres som Na ^ (+) Cl ^ (-). For å holde metan som et eksempel, har metanmolekylet totalt 10 elektroner: 6 fra C o
Hvorfor brukes western blot til å bekrefte elisa? + Eksempel
Vanligvis er dette en antistoff-spesifisitetstest. I en ELISA er det svært vanskelig å fortelle om antistoffet ditt er bindende for proteinet av interesse, et helt annet protein eller en rekke proteiner. Western blottet vil bli brukt til å kontrollere antistoffets spesifisitet (du bør merke at Western blott ikke kan oppdage alle kryssreaksjoner med feil proteiner). I Western blot kan du se størrelsen på proteinet som antistoffet er bindende til (du kan ikke i en ELISA). Hvis for eksempel antistoffet ditt burde være bindende til et protein på 56 kDa og du ser et bånd på ~ 56