Svar:
ELISA står for enzymbundet immunosorbentanalyse og brukes til å teste / identifisere et stoff ved hjelp av antistoffer og fargeskift.
Forklaring:
I denne prosess festes en ukjent mengde antigen til en overflate etterfulgt av anvendelse av et spesifikt antistoff. Antistoffet binder til antigenet for å danne et kompleks. Antistoffet er co-valent knyttet til et enzym. Et stoff som kan konvertere til et påvisbart signal (som en fargeendring) er endelig lagt til. Det synlige signalet angir mengden antigener i prøven, som korrelerer med mengden av analyt som er tilstede i den opprinnelige prøven.
ELISA-tester er raske og kan håndtere et stort antall prøver parallelt. De er dermed et meget populært valg for evaluering av ulike forsknings- og diagnostiseringsverktøy.
Hva er forskjellen mellom antistofffangst ELISA og Sandwich ELISA?
Så vidt jeg vet (og jeg står til å bli korrigert på dette) er det ingen forskjell. Så langt jeg vet "antistofffangst" og "sandwich", er ELISAer de samme. I begge tilfeller belegges et "fangst" antistoff på ELISA-platen (reservebindingssteder blokkeres) før tilsetningen av prøven. Antigenet i prøven binder til "fangst" -antistoffet, og deretter vaskes noe ubundet materiale bort. Ved å bruke et "fangst" antistoff øker du effektivt mengden antigen tilstede for deteksjon. Du fortsetter deretter med en standard ELISA.
Hvorfor brukes western blot til å bekrefte elisa? + Eksempel
Vanligvis er dette en antistoff-spesifisitetstest. I en ELISA er det svært vanskelig å fortelle om antistoffet ditt er bindende for proteinet av interesse, et helt annet protein eller en rekke proteiner. Western blottet vil bli brukt til å kontrollere antistoffets spesifisitet (du bør merke at Western blott ikke kan oppdage alle kryssreaksjoner med feil proteiner). I Western blot kan du se størrelsen på proteinet som antistoffet er bindende til (du kan ikke i en ELISA). Hvis for eksempel antistoffet ditt burde være bindende til et protein på 56 kDa og du ser et bånd på ~ 56
Hva gjør primære antistoffer og sekundære antistoffer i ELISA-testen?
Det avhenger av typen ELISA-analyse. ELISA = Enzymkoblet immunosorbentanalyse. Det finnes forskjellige typer ELISA-analyser. Det du trenger er: Antistoff med et enzym festet til det antigen som antistoffet binder substratet til enzymet som forårsaker en målbar reaksjon. Det enzym som er festet til antistoffet, er ofte HRP (pepperrotperoksidase). HRP kan reagere med forskjellige substrater som enten endrer farge eller avgir lys, både målbare. Bildet viser en oversikt over de forskjellige typer ELISA-analyser. Jeg vil forklare hvordan de fungerer nedenfor. Direkte ELISA En plate er belagt med antigenet (A